通过已知的目的片段的长度 来设置反应时间 结束的地方就大概确定了 建议用 RACE 嵌套引物 从两端来合成 找出重叠的地方 AMBION 的 first choice....(忘记了名称) http://baike.baidu.com/view/1579416.html?tp=1_00 应该对你有帮助吧...我老师做线虫的ITS区 也是用的RACE