核酸分子杂交的主要实验方法有哪些？主要用途是什么

核酸分子杂交的主要实验方法和主要用途分述如下：

一、方法：核酸分子杂交的主要实验方法有：膜上杂交和原位杂交

• 杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA，也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的，也可以在细胞内杂交，即细胞原位杂交。探针必须经过标记，以便示踪和检测。使用最普遍的探针标记物是同位素，但由于同位素的安全性，近年来发展了许多非同位素标记探针的方法。

二、应用：

• 核酸分子杂交作为一项基本技术，已应用于核酸结构与功能研究的各个方面。核酸分子杂交具有很高的灵敏度和高度的特异性，因而该技术在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用，而且在临床诊断上的应用也日趋增多。

• 在医学上，目前已用于多种遗传性疾病的基因诊断（gene diagnosis），恶性肿瘤的基因分析，传染病病原体的检测等领域中，其成果大大促进了现代医学的进步和发展。

• 基因工程第三步目的基因的鉴定中

  1.鉴定目的基因是否整合到染色体DNA上：DNA-DNA分子杂交

  2.鉴定目的基因是否准确表达蛋白质：RNA-DNA分子杂交或抗原-抗体杂交。

  注：其中DNA-DNA分子杂交与RNA-DNA分子杂交属于核酸分子杂交。