请问如何确定LAMP反应发生了非特异性扩增还是产物污染

2025-04-05 13:56:35

推荐回答（3个）

回答1：

把体系中的成分挨个换一遍，看是哪个污染了，如果每一个成分都换了阴性还是有扩增，就是非特异扩增；
把阴性、阳性样品的序列进行比对，如果阳性序列特异性不高，那相应的引物也是有可能扩增阴性的；
Bst酶比Bsm容错率高，更容易扩增出非特异产物；

回答2：

PCR非特异性扩增指的是你进行PCR所扩增出来的条带不是所要的，引物与模板在非目的条带处有错配，导致延伸产物不是目的条带。非特异性扩增在琼脂糖电泳时可以看到在目的条带外出现了其他条带。引起非特异性扩增的原因有很多，Mg2+浓度过高、退火温度太低、引物特异性不好等等原因

回答3：

请问楼主这个问题解决了吗？我也遇到这样的问题了。