1)加入20ul Rnase-free Water, 加入350 µlBuffer RLT并充分混匀。
2)加入250 µl无水乙醇,Tip头充分混匀。
3)将共计700 µl含总RNA的溶液转入套在2 ml离心管内的RNeasy 柱子内,³8000 g离心15-30sec,弃去滤过液。
4)吸取500 µlBuffer RPE到RNeasy mini 柱子内,³8000 g离心洗涤15—30sec,弃去滤过液,再用500 µlBuffer RPE在³8000 g离心洗涤2 min,弃去滤过液和2 ml的套管,将RNeasy mini柱子转入一新的1.5 mlEppendorf管中。
5)吸取 30 µlRNase free的水, 静置1 min ,³8000 g离心洗脱1 min。
6)吸取30 µlRNase free的水,静置1 min ,³8000 g离心洗脱1 min。