质粒和外源基因连接前要用同种限制酶切割
这样变成了有相同粘性末端的链状
本来是想链壮质粒和链状外源基因连接的
但是此时一个质粒和另一个质粒也可以连接
一个外源基因可以和另一个外源基因连接
而且是两端都连接
变成了环状
所以叫自身环化
如果操作不当，目的基因和质粒都有可能自身环化。
目的基因自身环化，则这个环上不含有复制起点、标记基因，无法进行扩增和筛选；质粒自身环化，则环上不含有目的基因，为空载体，是无用的。
所以，必须保证目的基因和质粒载体二者正确连接、环化。
果操作不当、标记基因，无法进行扩增和筛选；质粒自身环化，是无用的。
所以，则环上不含有目的基因，为空载体，必须保证目的基因和质粒载体二者正确连接，目的基因和质粒都有可能自身环化。
目的基因自身环化，则这个环上不含有复制起点
导入之后就已经是环形得了，如果自身环化那么导入的目的基因就没用了
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