采用巢式PCR进行扩增，在多轮扩增结果中提高扩增特异性和灵敏度。与普通PCR不同的是，它采用两对引物进行扩增，首先用第一对引物普通PCR，然后将第一轮扩增的产物稀释100倍后用第二对引物（巢式引物）二次扩增。因此采用巢式PCR可以大大增加困难模板扩增的特异性和有限靶序列的灵敏度。
