A、用苏丹Ⅲ给花生子叶薄片染色后，用酒精洗去浮色，制成装片，A错误；B、玉米雌雄同株异花，进行自交、杂交都非常便利，因此过杂交实验验证基因自由组合定律时，实验材料选用玉米比选用小麦更好，B正确；C、洋葱鳞片叶表皮细胞已经高度分化，不再分裂，不适宜进行作为有丝分裂实验材料，C错误；D、观察线粒体时，不适于用菠菜叶作实验材料，因为菠菜叶中含有叶绿体，有颜色干扰，D错误．故选：B．
