斐林溶液a和b混合时,硫酸铜与氢氧化钠反应,生成氢氧化铜沉淀。
酒石酸钾钠溶解氢氧化铜:氢氧化铜和酒石酸钾钠反应,生成酒石酸钾钠与铜的络合物,使氢氧化铜溶解。(CHOH)₂COONa+Cu(OH)₂→COOK(CHO )₂CuCOONa+2H₂O。
酒石酸钾钠铜络合物中的二价铜就是一个氧化剂,能使还原糖氧化,而二价铜被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀:
2Cu(OH)₂→COOK(CHO)₂Cu COONa+CHO(CHOH)₄CH₂OH+2H₂O→ 2COOK(CHOH)₂COONa+COOH(CHOH)₄CH₂OH+Cu₂O。
扩展资料
斐林试剂由氢氧化钠的含量为0.1g/mL的溶液和硫酸铜的含量为0.05g/mL的溶液,还有含量为0.2g/mL酒石酸钾钠配制而成的,其本质为铜离子和酒石酸形成的配合物酒石酸合铜。
斐林试剂为二价铜离子的酒石酸钾钠配合物,可以被脂肪醛或还原性糖还原为氧化亚铜。斐林试剂为深蓝色溶液, 在与脂肪醛或还原性糖共热时, 蓝色消失,析出红色的氧化亚铜沉淀。在氧化亚铜析出过程中, 反应液的颜色可能经过由蓝色→绿色→黄色→红色沉淀的逐渐变化,反应较快时,直接观察到红色沉淀。
它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。因此,斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。
参考资料来源:百度百科-斐林试剂
参考资料来源:百度百科-还原糖当量
斐林溶液a和b为什么要临时混合使用
1、试剂的浓度和配制方法不同
斐林试剂:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液;乙液:0.05g/mL的 溶液.
使用前临时配制,在2mL的甲液中滴入4滴~5滴乙液,振荡使混合均匀后即可.
双缩脲试剂:A液:0.1g/mL的NaOH溶液;B液:0.01g/mL的 溶液.
分别配制好A液和B液即可.
2、试剂的作用和鉴定原理不同
斐林试剂:
作用:可鉴定可溶性还原糖.
原理:甲液和乙液混合后产生 沉淀,与含醛基(—CHO)的可溶性还原糖,在加热条件下反应,将 还原为砖红色的 沉淀.
双缩脲试剂:
作用:可鉴定蛋白质溶液.
原理:在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲( )能与 反应,形成紫色络合物.由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键(—CO—NH—),因此,蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色.
3、试剂的使用方法不同
斐林试剂:使用时现配现用,要水浴加热.如果斐林试剂放置一段时间,因 沉淀在溶液底部而无法使用.使用时,甲液和乙液不可分别加入到待测液中,否则,待测液(苹果组织样液)中的有机酸会中和NaOH,使产生的 不足而影响鉴定.
双缩脲试剂:使用时,双缩脲试剂A液和双缩脲试剂B液要分别先后加入到待测液中,不需要加热.双缩脲试剂A液和双缩脲试剂B液不可以混合后再加入待测液.如先混合,则会产生 沉淀而无 产生.加入的双缩脲试剂B液( )也不能过量,否则蓝色的 会遮盖产生的紫色.
临时混合使用是因为氢氧化铜很不稳定,易分解为氧化铜和水,分解后就失效了,所以要现场混合以后马上使用。