有三种形式的载体构建方式：以pri-miRNA形式构建，以pre-miRNA形式构建，以mature-miRNA形式构建。其中以pre-miRNA形式构建的方法应用最早也最广泛。pre-miRNA大约70bp,因为要形成茎环结构，必须构建在含有H1或者U6启动子的载体上（麒盟）。望采纳。
构建了能表达miRNA前体的慢病毒载体，目前能提供人类全基因组miRNA前体的表达载体。U6启动子驱动包括前体茎环（stem-loop）结构和前体上下游各100-150个碱基的基因组序列的miRNA前体转录，随后通过RNAi的酶系加工产生成熟的miRNA。载体上还含有puromycin抗性基因和eGFP荧光报告基因。可用于研究miRNA与靶基因互作的验证，也可用于瞬时转染或构建稳定表达细胞株研究miRNA的功能。
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