二胡两根空弦之间的音程关系为纯五度定弦，即外弦比内弦音高一个纯五度的音程。内弦为小字一组中的d1（re），实际音高为294Hz，外弦为小字一组的a1（La）,实际音高为440Hz。调音时只需要将两根弦的音高调到这两个频率值即可。
