PCR技术中为什么3次循环才能得到目的基因

2025-03-11 00:20:53
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回答1:

原因如下:

1、第一个循环扩增出来的新片段很长很长。

2、第二个循环以新的长片段为模板进行,但新片段的一端是引物开头的,所以第二个循环得到的片段就是我们需要的长度,但只是一条链,所以还不能分离出目的基因。

3、第三个循环,当以第二个循环得到的新片段为模板时,因为这个片段的长度就是需要扩增的长度,当第三个循环完成时,这个片段是需要的长度,且是双链DNA,这就得到了需要的目的基因了。

扩展资料:

PCR的每个循环过程包括高温变性、低温退火、中温延伸三个不同的事件:

1、变性:加热使模板DNA在高温下(94℃左右)双链间的氢键断裂而形成两条单链。

2、退火:使溶液温度降至50~60℃,模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合。

3、延伸:溶液反应温度升至72℃,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在引物的引导下,利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸(dNTP),按5'一3’方向复制出互补DNA。

参考资料来源:百度百科-PCR技术

回答2:

因为在前两个循环内产生的DNA链中都会有除目的基因外的多余部分,只有到了第三次循环才会得到只有目的基因的DNA链。