可能是你的pcr比较短,一个测序反应就可以了,同时你没有要求测通,因为由于测序原理的原因,从测序引物开始的前几十个碱基是不准或者测不到的,所以如果想知道一个pcr的全部序列就需要一对引物进行双向测序,另一条引物可以是你的扩增引物也可是根据已测序列设计的反向引物。