当然要先用液态不加抗生素的LB复苏好不好。。。不要纠结在转化涂板的过程上 要么就是你的质粒酶切完后回收的片段不对 要么就是你的胶回收产物不对
你用什么酶做的PCR?连T载体末端必须有A感受态还有没有用?最好转个质粒验证一下,做这个感受态是非常重要的。胶回收的时候有没有把wash buffer 蒸发干净?