一般用生长圈法.
利用一些有特别营养要求的微生物作为工具菌,若待分离的菌在缺乏上述营养物的条件下,能合成该营养物,或能分泌酶将该营养物的前体转化成营养物,那么,在这些菌的周围就会有工具菌生长,形成环绕菌落生长的生长圈。该法常用来选育氨基酸、核苷酸和维生素的生产菌。
初筛1:用选择性培养基,把N源去掉,加入酪素(酪蛋白),其他营养成分照基础培养基就行了,这样,产蛋白酶的菌种能将酪素分解成酪氨酸,就有可利用的N源,不产蛋白酶的菌种不能利用酪素,则没有N源,产蛋白酶的菌种成为优势菌,挑出,换培养基。
初筛2:初筛1所得菌种用透明圈法(蛋白酶水解酪素产生透明圈,直径越大,酶活越高,具体步骤自己找)挑出蛋白酶活力高的菌种,接入摇瓶培养
复筛:初筛2所得菌以福林试剂法测酶活(以Folin染色,测吸光度,具体步骤自己找),酶活最高者为最终菌种.