1.首先根据要表达的蛋白质确定对应的基因片段2.从基因文库中调出所需的基因片段(如果自然界不存在,当然是要人为去设计)3.选择载体,利用限制性内切酶和DNA连接酶将目的基因插入载体(如果在表达前你还需要筛选或检测,可能你还要再插入标记基因)4.将载体导入受体细胞。植物可以选择导入体细胞,然后根据全能性进行植物组织培养。动物就要用显微注射导入受精卵才能表达。至于大肠杆菌,得到的蛋白质可能没有活性,因为它没有高级细胞器。(大概的吧)