PCR所用的枪头、pcr小管,水这些必须经过灭菌后使用,加样也尽量在超净台的酒精灯旁边加,不同人尽量使用各自的buffer和引物,这样可以保证污染概率最低,当然啦,模版里面最好也不要有污染,如果是扩出条带混杂或者特异性不强的话可能不是污染的问题,在引物、模板、酶、buffer、退火温度等方面都有可能出现问题,愿君取得满意结果!
把灭菌水、buffer、taq酶、引物全换掉,有段时间我们实验室PCR总出现负对照扩出条带,很难说哪个污染了,还不如全部换掉。其实普通PCR也不用像你说的那样夸张吧,一般还是比较难污染的。
预防RNA实验室污染的措施:1)严格执行核酸实验室各种制度:a、单向工作流向 ;b、仪器、物品专用;c、各区域只用于特定操作,不能从事其他工作;d、安全的操作行为;d、实验室的清洁。
2)关注细节:a、控制实验室内人员数量;b、开盖时避免触及标本管和耗材管口;c、避免在已经开盖的标本和开盖的耗材上面移动;d、识别并限定手套更换时机;e、实验结束后垃圾立即封袋移出实验室。
我汗 有没有这么夸张 你那不是污染吧 是非特异性条带吧 要么就是模板不纯 要么就是水有问题