不知道你所谓的高是相对什么而言的高,阴性一般是相对数值,选用的波长和抗体的滴度都可能使数值偏高,关键是看你的阳性和阴性的比值是怎么样的,一般要大于2.1才算是正常的阳性。
遇到非特异反映了吧,建议换个试剂盒做做看,如果反应值低,就是试剂盒特异性的问题;如果还是很高,就可能是阳性血。
我也做了这个实验,也是阴性血清的OD值很高,按实验结果上来说阴性对照血清的OD值不应大于0.2,我做了好几次都是这样,可能是因为加底物(变蓝)的时候在恒温箱时间过长,导致阴性血清的OD值偏高。
推荐你在二抗稀释液中添加用3%BSA以及5%的山羊血清可以降低阴性值