求助柠檬酸合成酶活性测定方法

2025-03-04 13:43:43
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回答1:

一般机器都是检测一定波长下面的吸光读Absorbence(A),或者光密度Optical Density(OD),
Amin-A0:即第min时间的吸光度减去反应开始时的吸光度(即终点法检测,使用两个数据点来计算)。
/min:即上述吸光度的差值再除以时间,也就是单位时间吸光度的改变。
由于吸光度等于,或者正比与产物的生成或者底物的减少,所以这就是单位时间内产物的生成量或者底物的减少量,也就是该反应的速率。
/mg(protein):是指将上述反应速率除以你使用的酶量,即单位酶量能产生的反应速率,也就可以认为是一个酶的Kcat值,指标一个酶的酶活力。

当然,这个Amin以及A0必须在酶反应在线性时间内检测,超出线性范围之后就不对了。