非免疫动物血清起封闭内源性抗体（Ig）的作用，生产厂家不同不影响封闭效果，但需注意该动物的种属应与一抗或SP试剂盒中的二抗不同，否则会产生假阳性。稀释方法：非免疫动物血清/0.01M的PBS＝1/19～1/9（5％～10％），PBS也可用0.1M的TRIS盐酸代替，用法同原试剂盒中的封闭血清。注意，稀释后的非免疫动物血清最多用3天，最好即配即用。
