首先根据蛋白性质及实验要求选择表达载体,比如是原核还是真核表达,是否加标签,是否控制表达位置及强度等。然后根据载体和目的蛋白设计引物,要考虑加酶切位点,保护碱基等。其次选择合适组织提取RNA,RT-PCR,酶切,克隆,鉴定,扩增质粒,转入宿主,诱导表达,纯化,鉴定。