fsc代表的是forward scatter,这个参数和细胞的大小成正比,A是area的缩写,H是height的缩写。这是机器在记录信号时所采用的参数(不显示在用户界面,在调试机器的时候可以显示)
每个细胞通过激光的时候,机器都会记录一个波状信号(一个拱形的信号),H就是这个拱的高度(代表的是信号的强度),A就是这个拱的曲线下面积,代表信号强度和细胞大小的关系。其实还应该有一个参数W,是width的缩写,是这个拱的宽度,代表细胞通过激光束所花的时间。
不光是FSC,其他每一个通道都有这三个参数可以记录。可以用其中的任何一个,根据实验要求来作图。机器就会根据设置显示出最终的图形了。
扩展资料:
注意事项:
1、有时候,可以染一种在感兴趣的细胞与其他细胞都有表达的标志物(例如在所有白细胞上都表达的 CD45)。虽然这个步骤不是必须的,但对于分析一些稀少细胞类型时有帮助。
2、染细胞时,建议将细胞分在两个试管中,在其中一个试管中,用荧光标记的抗体染感兴趣的细胞,而另一个试管应用荧光同型抗体做为相应的阴性对照,这样有助于在分析中更精确地区分阳性信号和阴性的荧光背景。
3、在必要时,需要通过设置和调节 FSC 阈值,将大部分的细胞碎片、气泡和激光噪声的干扰(全都属于 FSC-low 的区域)排除在分析区域之外。
参考资料来源:百度百科-流式细胞术:原理、操作及应用
fsc代表的是forward scatter,这个参数和细胞的大小成正比,A是area的缩写,H是height的缩写。这是机器在记录信号时所采用的参数(不显示在用户界面,在调试机器的时候可以显示)
每个细胞通过激光的时候,机器都会记录一个波状信号(一个拱形的信号),H就是这个拱的高度(代表的是信号的强度),A就是这个拱的曲线下面积,代表信号强度和细胞大小的关系。其实还应该有一个参数W,是width的缩写,是这个拱的宽度,代表细胞通过激光束所花的时间。
散点图通常用于显示和比较数值
例如科学数据、统计数据和工程数据。
当要在不考虑时间的情况下比较大量数据点时,请使用散点图。散点图中包含的数据越多,比较的效果就越好。
气泡图要求每个数据点具有两个值(探顶值和探底值)。
对于处理值的分布和数据点的分簇,散点图都很理想。如果数据集中包含非常多的点(例如,几千个点),那么散点图便是最佳图表类型。在点状图中显示多个序列看上去非常混乱,这种情况下,应避免使用点状图,而应考虑使用折线图。
以上内容参考:百度百科-散点图
前向角散射,即FSC与细胞直径平分正相关(大小),所以我们平时上机的时候,有时用FSC做阈值,排除碎片及其它颗粒,避免干扰。
侧向角散射,即SSC是指与激光束正交90度方向的散射信号,它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更敏感,可以提供细胞内结构及颗粒性质的信息
FL2-A ,FL2-W 中A和W的含义
FL2-H1024,FL2-H256 中H的含义,1024和256又代表什么呢。
名词“道数”是怎么定义的?
w好像代表脉冲宽度,但是脉冲宽度反映的是细胞什么特性呢?
H-脉冲高度反映细胞什么特性呢?
好像你做的是细胞周期分析,
如果是,FL2-A代表的是荧光峰面积,反映了细胞DNA含量(前提是用Rnase处理去掉了RNA);
FL2-W代表的是荧光峰宽度,这个值可以区分单个细胞和双联体细胞;
下面的1024和256是定义数据文件大小的(记得培训时工程师这么说的)
-H好像没有什么特殊含义 ,就是指这个通道了,
一般检测那个通道的荧光就是选择哪个-H,比如FSC-H,SSC-H,FL1-H等等
流式涉及的调节参数太多了,主要的有:
1.电压
2.阈值
3.荧光补偿
4.通道选择:需要哪些通道、选择面积/高度/宽度、线性/Log
5.停止条件选择
太多太多了
FL2-A代表FL2 AREA,FL2-H即FL2 HEIGHT,通过这两个参数,可以将粘连体排除出去,因为粘连体跟多倍体有相同的FL2-A,但是FL2-H远远大于正常细胞。
正确的设置是将FL2-A设置在200附近。当然,不设在200也可以,但是那样会对日后的分析造成困难。200道是对周期分析最佳的参数。
FSC是前向角散射,一般代表细胞的体积,值越大代表细胞越大。
SSC是侧向角散射,一般代表细胞的颗粒度,值越大代表细胞的颗粒度越大,颗粒度指细胞表面的皱折度,细胞内亚细胞器、颗粒的数目等。