1.棋盘滴定又称为方阵滴定，即同时将抗原、抗体进行稀释，进行ELISA实验从而确定抗原抗体反应的最佳比例！方阵滴定不太好做，你可以将方阵滴定拆开进行，即先固定抗原，使用不同浓度的抗体，从而确定最佳抗体浓度，然后固定这个抗体浓度，使用不同浓度的抗原，继而确定最佳抗原浓度。当然包被抗原、抗体浓度也有所依据，即抗原一般是1-5ug/ml 、抗体是1-15ug/ml包被。
2.ELISA实验作预试验也是比较重要的，这样可以确定抗原抗体大致的使用量，可以确定酶标抗体的稀释浓度，可以检测实验系统是否正确……你既然做双夹心，可以先固定被检测抗原的浓度，采用不同浓度的包被抗体和不同浓度的检测抗体，确定最佳包被和检测系统。
3. 你要检测血浆中的IL-12和IFN-y，可能会由于红细胞内源性过氧化氢酶而影响实验的敏感性，最好做好正常血浆的对照。
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