A、根据目的基因的位置可知，用限制酶PstⅠ、SmaⅠ切割含目的基因的DNA，A正确；B、将目的基因导入植物细胞通常采用农杆菌转化法，B正确；C、氨苄青霉素抗性基因是标记基因，其作用是选出含有目的基因的细胞，但不能促进目的基因的表达，C错误；D、检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体，可以DNA分子杂交技术，D正确．故选：C．
