A、构建基因表达载体时,往往需要用同一种限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子,以产生相同的黏性末端,A正确;B、将目的基因导入动物细胞应选用显微注射法,B正确;C、植物体细胞杂交时所选材料应该是不同植物的体细胞,C正确;D、将目的基因导入单子植物细胞常用基因枪法,D错误.故选:D.