科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长.质粒上有Pst

2025-04-28 22:10:38
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回答1:

(1)含目的基因的外源DNA分子上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ三种限制酶切割位点,但用AluⅠ切割会破坏目的基因,单独用PstⅠ切割会导致目的基因或质粒自身环化,也会导致目的基因和载体的黏性末端发生任意连接,因此为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用限制酶PstⅠ、SmaⅠ分别对含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒进行切割;用限制酶PstⅠ、SmaⅠ切割含目的基因的外源DNA分子后会产生4种DNA片段,而用限制酶PstⅠ、SmaⅠ切割质粒后会产生2种DNA片段.
(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长,要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应使基因表达载体Ⅰ中含有抗氨苄青霉素基因作为标记基因.
(3)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法;在个体水平检测鱼抗冻蛋白基因是否表达,通常采用将植物在寒冷的环境中培养方法.
故答案为:
(1)PstⅠ、SmaⅠ含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒    4、2
(2)抗氨苄青霉素基因
(3)农杆菌转化    将植物在寒冷的环境中培养