基因工程菌在传代过程中常 出现质粒不稳定的现象。 质粒不稳定可分为: 分裂不稳定 结构不稳定
分裂不稳定:指工程菌分裂时出现一 定比例不含质粒子代菌的现象。 结构不稳定:指外源基因从质粒上丢 失或碱基重排、缺失所致工程菌性 能的改变
一、质粒不稳定产生的原因
常见分裂不稳定的两个因素:
⑴含质粒菌产生不含质粒子代菌的 频率;
⑵这两种菌比数率差异的大小。
对同一工程菌控制不同的比生长 数率可改变质粒的拷贝数: 低拷贝质粒工程菌产生不含质粒 子代菌频率高如增加工程菌质粒拷 贝数可提高稳定性; 高拷贝质粒工程菌产生不含质粒 子代菌频率低但对稳定性不利。
菌体生长数率对质粒拷贝数和质粒稳定性 有一影响。高生长数率时质粒拷贝数下降, 但稳定性增加。