已知某段DNA序列,如何设计实验得到该DNA可能具有的功能

2025-02-26 16:56:06
推荐回答(5个)
回答1:

1. 先做序列分析。看是编码序列还是非编码序列。如果是编码序列,则看所编码的蛋白质功能。非编码序列,到Google上搜promoter prediction。然后输入你的序列。可以推测该序列作为promoter的功能。

2. 证明就是要做实验了。ChIP是金标准。原理就是先固定活细胞,使DNA和其上所结合的蛋白发生交联。再用超声震荡是DNA-蛋白质复合体的大小到1K左右。然后用针对该蛋白的抗体做免疫沉淀。这样只有和该蛋白结合的DNA才会被一起沉淀下来。然后复性DNA。收集后做PCR。看是不是你要的那段序列。

回答2:

一个DNA序列不一定是一个基因,个人认为要是考题的话改成基因比较好。将含有这个基因的正义和反义序列的载体分别导入该物种,使基因超表达或沉默,看看对生物体的影响以推测其功能。第二题的话,用该蛋白与部分酶切后电泳分离的DNA片段杂交看看有无杂交信号,有的话回收该DNA片段,与特殊的用于启动子筛选的载体连接,导入菌种看看有没有阳性菌,有的话就说明该蛋白与启动子有相互作用啦!当然在这里只是简单叙述一下,做起来的话会很麻烦也有一定难度。

回答3:

对于基因组序列分析,采用单链DNA模板和缓冲液梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种有效的测定方法。

回答4:

第一个问题:RNAi,
第二个问题:CHIP(染色质免疫沉淀)

回答5:

第一个 设计引物 pcr扩增 然后转入感受态 E. coli 看表达效果
或者尝试做基因knock out 看有什么影响 剩下我也不知道有什么好方法了~~

第二个,去服务器上做一个结构模拟 看一下是不是相应的DNA结合位点 另外貌似现在不是有转录因子的数据库吗?可以尝试着比对一下