1、正相色谱
正相色谱用的固定相通常为硅胶以及其他具有极性官能团胺基团,如(nh2,aps)和氰基团(cn,cps)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷,氯仿,二氯甲烷等。
2、反向色谱
反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有:c18(ods)、c8(mos)、c4(butyl)、c6h5(phenyl)等。
极性色谱柱的固定相当然是极性的了,所谓的极性色谱柱就是指的固定相是极性的。一般在基质上键合一些羟基或是氰基,胺基等使固定相聚有一定的极性。
非极性色谱柱,比如气相的DB-1或是液相色谱的C18,其在固定相表面还是有非常多的羟基的,有时为了尽量减少这些羟基的影响,还要进行小分子的封端,不过,有时这些羟基也会对分离子有特殊的作用。