A、洋葱根尖分生区的细胞没有成熟的大液泡,不能用来观察质壁分离,A错误;B、胰蛋白酶本质是蛋白质,由C、H、O、N组成,没有P元素,B错误;C、探究细胞大小与物质运输效率的关系也需要设置对照组,C错误;D、RNA主要分布在细胞质中,DNA主要分布在细胞核中,故细胞内染成红色的面积显著大于染成绿色的面积,D正确.故选:D.