1、斐林试剂
斐林试剂甲和斐林试剂乙混合后会因酒石酸有一定的还原性而自发地缓慢产生氧化亚铜沉淀,因此斐林试剂一般为现用现配。
2、双缩脲试剂
双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液;
双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液。
先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL,振荡均匀(营造碱性环境),再加入1~2滴双缩脲试剂B,振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。
扩展资料
1、在使用双缩脲试剂时候,必须注意,必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液,再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜溶液,再加入氢氧化钠溶液,则无法充分制造碱性环境,此时硫酸铜会与氢氧化钠发生复分解反应,生成蓝色氢氧化铜沉淀,导致现象不清,无法较好地达到实验目的。
2、斐林试剂使用时,先等体积混合甲、乙两液,而后立即使用,反应需要加热(有时不加热也反应)。
参考资料来源:百度百科-斐林试剂
参考资料来源:百度百科-双缩脲试剂
需要现配现用的试剂主要是斐林试剂和二苯胺试剂,以及吡罗红甲基绿染色剂。
斐林试剂区别于双缩脲试剂:先加NaOH溶液,后加CuSO4溶液。先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。
吡罗红甲基绿染色剂:配制好的溶液易氧化,再使用时会影响实验结果。