1、将待检标本涂布于血平板（如果怀疑菌量少可以先增菌），37摄氏度，18-24小时培养，如出现溶血环者、灰白色、圆形、突起、光滑、直径0.5mm左右的小菌落为可疑菌落。
2、将可疑菌落做革兰氏染色，链球菌应为革兰氏阳性、无芽胞、圆形球菌，从固体培养基上挑取的不一定能观察到链状。并接种到另一块血平板上进行分纯，同时获得更多菌落方便后续检验。
3、革兰氏染色符合者做生化试验，括号内为预期结果，如下：血浆凝固酶（阴性），葡萄糖（产酸不产气），奥普托欣试验（敏感）。血浆凝固酶和葡萄糖必做。
以上符合即可判断为链球菌。
4、做杆菌肽实验，敏感者为A群链球菌，反之则为其他群链球菌。或者做A群链球菌的血清凝集，但是必须准备有血清。
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