实验原理: 在诱导物(如仙台病毒,聚乙二醇)作用下,相互靠近的细胞发生凝集,随后在质膜接触处发生质膜成份的一系列变化,主要是某些化学键的断裂与重排,进而细胞质沟通,形成一个大的双核或多核细胞。 二个以上的细胞合并成为一个双核或多核细胞称为融合细胞。
实验步骤: 一、50%PEG液的制备。称取一定量的PEG(WM=4000)放入烧杯中,沸水浴加热,使之熔化,待冷却至50℃时,加入等体积预热至50℃的RPN1640培养液溶液,混匀,置37℃备用。
二、融合
1、 取鸡血1ml加入4ml 0.85%生理盐水,充分混均。
2、将混合液于800r/min离心7~8min,弃去上清,加入8~10Hanks,重复上述条件离心两次。最后弃去上清。将离心管倾置于滤纸上,尽量流尽剩余液体。
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