SDS-PAGE和分子筛过滤层析测定蛋白质分子量在原理和方法上有何不同。

2025-03-12 20:31:57
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回答1:

sds分离靠的是在电场中蛋白质分子跟page的结合后的分子量大小从而在凝胶中跑的速度不同而分开的。

分子筛是根据不同分子量的分子大小不同,从而进行蛋白质分离,达到测量分子量的目的的。


SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳,作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸。

作用原理:聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。

而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。该技术最初由shapiro于1967年建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂(SDS即十二烷基硫酸钠)后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小(可以忽略电荷因素)。

回答2:

sds分离靠的是在电场中蛋白质分子跟page的结合后的分子量大小从而在凝胶中跑的速度不同而分开的,分子筛是根据不同分子量的分子大小不同,从而进行蛋白质分离,达到测量分子量的目的的

回答3:

都是根据分子大小分离,但方法上一个是电泳,一个是层析。分子筛的原理是分子小的走的路程远,出来晚;PAGE则是分子大的阻力大,跑得慢。最后结果正好相反。

回答4:

一个是电泳,一个是过滤。