两个原因：1、反转失败，模板里没有DNA；2、PCR失败，例如引物不行，退火温度不对等。这也没办法了，你先确定引物能不能从基因组里扩出条带。不过这种情况很可能是反转失败了。
多种原因要逐一排除：
1.先用内参基因检测一下如 β-actin，GAPDH，18s-rRNA这类基因是生物体或者细胞中稳定表达的基因，表达量几乎不变，如果有条带证明反转录没问题。
2.内参检测时候最好让别人代为操作，可以排除人为操原因
3.跑PCR时候可以加一个内参做阳性对照，保证CDNA质量（反复冻融会影响CDNA质量）
4.适当降低退火温度2~4℃
5.上述都排除之后就是引物问题了。
PCR试剂除了taq酶要放在-20℃，其他的都不能反复冻融。建议分装出来后长期保存放-20 使用液放4℃
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