1、PEG的分子量与浓度 细胞融合效果与PEG的分子量及其浓度成正比；但PEG的分子量越大、浓度越高，对细胞的毒性也就越大。为了兼顾二者，在实验时常常采用的PEG分子量一般为1000~4000，浓度一般为40~60%。 2、PEG的pH值 经验证，PEG的pH值在8.0~8.2之间融合效果最好。 3、PEG的处理时间 处理时间越长，融合效果越好，但对细胞的毒害也就越大。故一般将处理时间限制在1分钟之内。本实验中细胞融合后无需继续培养，故处理时间可适当放宽至数分钟。 4、融合时的温度 由于生物膜膜的流动性与温度成正比，故细胞的融合效果也与温度成正比。因此，为了获得更好的融合效果，在细胞可能承受的温度范围内可适当提高处理的温度。对于哺乳动物的细,一般采用的温度为38~40℃。
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