A、基因工程中常用的工具酶有DNA连接酶、限制性核酸内切酶,运载体不属于工具酶,A错误;B、目的基因进入受体细胞需要检测和鉴定,不一定能成功实现表达,B错误;C、一种限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列,即具有特异性,C错误;D、选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快,并且遗传物质少,D正确.故选:D.