1.污染肯定是第一个要关注的问题，菌种很容易受污染，或者菌种变异，导致某些生理或者代谢发生变化，导致实验结果不准确。2.培养基问题，不同的生理生化反应，所需要的培养基可能完全不同，这也是需要注意的。3.所检测的试剂或者底物无效等原因。4.所选择的检测手段不准确等原因。
1菌种不纯，培养过程中污染杂菌2.所用的试剂过期3.操作不当
