如何提高考马斯亮蓝染色法的准确性

2025-03-10 12:37:07
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回答1:

可用于SDS-PAGE 或非变性PAGE蛋白电泳的快速染色,提高准确性,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

考马斯亮蓝G250染色可以同时固定和染色,因此能立即观察显色结果,可用来确定电泳时间,观察初步结果。考马斯亮蓝R250染色灵敏度比G250髙得多,但对酸溶蛋白、醇溶蛋白不合适,因为在染色过程中,蛋白质会溶解在染色液或脱色液中。

考马斯亮蓝染色是用考马斯亮蓝进行蛋白质染色的方法。考马斯亮蓝是一种阴离子染料, 常用考马斯亮蓝G250和R250。

考马斯亮蓝 G250在游离状态下呈红色,当它与蛋白质 通过疏水结合后变为蓝色,蛋白质-色素结 合物在595nm波长下有最大光吸收。其光 吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。

以上内容参考:百度百科--考马斯亮蓝染色

回答2:

降低染色液浓度,缩短染色时间。考染太过,会使得所有蛋白质表面都包着厚厚的一层染料,无法定量。只有 降低染色液浓度,缩短染色时间 才能使得染色回到线性区域,让染料强度和蛋白质浓度成正比。