用PCR扩增目的基因,要想得到特异性产物需注意哪些事项

2025-04-29 23:03:53
推荐回答(4个)
回答1:

PCR扩增特异性取决于复性过程中引物与模板的结合。复性温度越高,产物特异性越高。复性温度越低,产物特异性越低。延伸时间过长可出现非特异扩增。循环次数越多,非特异扩增增加。MgCl2浓度: 可显著影响PCR的产量及产物特异性。过高:增加非特异扩增并影响产率。
由于PCR灵敏度非常高,所以应当采取措施以防反应混合物受痕量DNA的污染。
1.所有与PCR有关的试剂,只作PCR实验用,而不
挪作它用。
2. 操作中所用的PCR管、离心管、吸管头等都只能
一次性使用。
3. 每加一种反应物,应换新的枪头。

回答2:

首先,引物特异性要好
再,注意操作,避免交叉污染等

回答3:

最主要的设计好引物即可。

回答4:

引物啊,温度控制啊……