接种时,应在接种箱内的酒精灯旁操作,接种用的工具要在酒精灯火焰上烧灼,然后离开火焰,待工具的温度下降至常温后再进行操作.
这是因为要消毒杀灭其它杂菌，酒精灯旁可防止空气中其它杂菌的污染。另外一次无法完全杀死细菌，多次加热效果比连续加热消毒好。
为什么接种一定在酒精灯旁操作?
一般做纯培养都 对培养环境的结精度要求很高，当有其他杂菌污染时，可能会出现争夺营养，抑制目标菌株生长，甚至因杂菌和目标菌株外形相似无法分辩出目标菌株等问题，所以要在无菌环境下接种。
用简易的方法对木屑培养基进行灭菌时(用蒸笼灭菌),为什么要进行第二第三次的加热?
防治木屑上有其他菌体的芽孢，一次灭菌只能灭掉菌体，冷却后可以让芽孢发芽，再加热灭菌，重复上述步骤2～3次可以彻底灭菌。这是间歇灭菌的原理。
镊子等器具要在酒精灯上消毒，所以要在酒精灯边操作
因为一次无法完全杀死细菌，多次加热效果比连续加热消毒好。
酒精灯旁可防止杂菌污染
一次不保险。
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