用高效液相测定糖精钠时在处理样品时为什么要用氨水调节至中性

【GB/T 5009.29—1996】 食品山梨酸、苯甲酸测定 1 主题内容与适用范围本标准规定酱油、水汁、酱等食品山梨酸、苯甲酸含量测定本标准适用于酱油、水汁、酱等食品山梨酸、苯甲酸含量测定低检浓度：气相色谱低检量1μg用于色谱析品1g低检浓度1mg/kg第篇 气相色谱(第) 2 原理品酸化用乙醚提取山梨酸、苯甲酸用附氢火焰离化检测器气相色谱仪进行离测定与标准系列比较定量 3 试剂 3.1 乙醚：含氧化物 3.2 石油醚：沸程30～60℃ 3.3 盐酸 3.4 水硫酸钠 3.5 盐酸(1＋1)：取100mL盐酸加水稀释至200mL 3.6 氯化钠酸性溶液(40g/L)：于氯化钠溶液(40g/L)加少量盐酸(1＋1)酸化 3.7 山梨酸、苯甲酸标准溶液：准确称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g置于100mL容量瓶用石油醚—乙醚(3＋1)混合溶剂溶解并稀释至刻度溶液每毫升相于2.0mg山梨酸或苯甲酸 3.8 山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量山梨酸、苯甲酸标准溶液石油醚－乙醚(3＋1)混合溶剂稀释至每毫升相于50100150200250mg山梨酸或苯甲酸 4 仪器气相色谱仪：具氢火焰离化检测器 5 析步骤 5.1 品提取称取2.50g事先混合均匀品置于25mL带塞量筒加0.5mL盐酸(1＋1)酸化用1510mL乙醚提取两每振摇1min层乙醚提取液吸入另25mL带塞量筒合并乙醚提取液用3mL氯化钠酸性溶液(40g/L)洗涤两静止15min用滴管乙醚层通水硫酸钠滤入25mL容量瓶加乙醚至刻度混匀准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度试管置40℃水浴挥干加入2mL石油醚－乙醚(3＋1)混合溶剂溶解残渣备用 5.2 色谱参考条件 5.2.1 色谱柱：玻璃柱内径3mm2m内装涂5%(m/m)DEGS＋1%(m/m)H3PO4固定液60～80目Chromosorb W AW 5.2.2 气流速度：载气氮气50mL/min(氮气空气、氢气比按各仪器型号同选择各自佳比例条件) 5.2.3 温度：进口230℃；检测器230℃；柱温170℃ 5.3 测定进2μL标准系列各浓度标准使用液于气相色谱仪测同浓度山梨酸、苯甲酸峰高浓度横坐标相应峰高值纵坐标绘制标准曲线同进2μL品溶液测峰高与标准曲线比较定量 5.4 计算 式：X1——品山梨酸或苯甲酸含量g/kg； m1——测定用品液山梨酸或苯甲酸质量μg； V1——加入石油醚－乙醚(3＋1)混合溶剂体积mL； V2——测定进体积μL； m2——品质量g； 5——测定吸取乙醚提取液体积mL； 25——品乙醚提取液总体积mL由测苯甲酸量乘1.18即品苯甲酸钠含量结表述：报告算术平均值二位效数 5.5 允许差相相差≤10% 5.6 其色谱图山梨酸保留间253秒；苯甲酸保留间68秒（图略）第二篇 高效液相色谱(第二) 6 原理品加温除二氧化碳乙醇调pH至近性滤进高效液相色谱仪经反相色谱离根据保留间峰面积进行定性定量 7 试剂所用试剂除另规定外均析纯试剂水蒸馏水或同等纯度水溶液水溶液 7.1 甲醇：经滤膜(0.5μm)滤 7.2 稀氨水(1＋1)：氨水加水等体积混合 7.3 乙酸铵溶液(0.02mol/L)：称取1.54g乙酸铵加水至1000mL溶解经滤膜(0.45μm)滤 7.4 碳酸氢钠溶液(20g/L)：称取2g碳酸氢钠(优级纯)加水至100mL振摇溶解 7.5 苯甲酸标准储备溶液：准确称取0.1000g苯甲酸加碳酸氢钠溶液(20g/L)5mL加热溶解移入100mL容量瓶加水定容至100mL苯甲酸含量1mg/mL作储备溶液 7.6 山梨酸标准储备溶液：准确称取0.1000g山梨酸加碳酸氢钠溶液(20g/L)5mL加热溶解移入100mL容量瓶加水定容至100mL山梨酸含量1mg/mL作储备溶液 7.7 苯甲酸、山梨酸标准混合使用溶液：取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10.0mL放入100mL容量瓶加水至刻度溶液含苯甲酸、山梨酸各0.1mg/mL经滤膜(0.45μm)滤(同测定糖精钠加GB/T 5009.283.4糖精钠标准储备溶液) 8 仪器高效液相色谱仪(带紫外检测器) 9 析步骤 9.1 品处理 9.1.1 汽水：称取5.00～10.0g品放入烧杯微温搅拌除二氧化碳用氨水(1＋1)调pH约7加水定容至10～20mL经滤膜(0.45μm)滤 9.1.2 汁类：称取5.00～10.0g品用氨水(1＋1)调pH约7加水定容至适体积离沉淀清液经滤膜(0.45μm)滤 9.1.3 配制酒类：称取10.0g品放入烧杯水浴加热除乙醇用氨水(1＋1)调pH约7加水定容至适体积经滤膜(0.45μm)滤 9.2 高效液相色谱参考条件 9.2.1 色谱柱：YWG－C184.6mm×250mm10μm锈钢柱 9.2.2 流相：甲醇：乙酸铵溶液(0.02m0l/俯护碘咎鄢侥碉鞋冬猫L)(5：95) 9.2.3 流速：1mL/min 9.2.4 进量：10μL 9.2.5 检测器：紫外检测器波230μm灵敏度0.2AUFS根据保留间定性外标峰面积定量 9.3 计算 式：X2——品苯甲酸或山梨酸含量g/kg； m3——进体积苯甲酸或山梨酸质量mg； V4——进体积mL； V3——品稀释液总体积mL； m4——品质量g结表述：报告算术平均值二位效数 9.4 允许差：相相差≤10% 9.5 其同GB/T 5009.285.6注：本同测定糖精钠第三篇 薄层色谱(第三) 10 原理品酸化用乙醚提取苯甲酸、山梨酸品提取液浓缩点于聚酰胺薄层板展显色根据薄层板苯甲酸、山梨酸比移值与标准比较定性并进行概略定量 11 试剂 11.1 异丙醇 11.2 丁醇 11.3 石油醚：沸程30～60℃ 11.4 乙醚：含氧化物 11.5 氨水 11.6 水乙醇 11.7 聚酰胺粉：200目 11.8 盐酸(1＋1)：取100mL盐酸加水稀释至200mL 11.9 氯化钠酸性溶液(40g/L)：于氯化钠溶液(40g/L)加少量盐酸(1＋1)酸化 11.10 展剂 11.10.1 丁醇＋氨水＋水乙醇(7＋1＋2) 11.10.2 异丙醇＋氨水＋水乙醇(7＋1＋2) 11.11 山梨酸标准溶液：准确称取0.2000g山梨酸用少量乙醇溶解移入100mL容量瓶并稀释至刻度溶液每毫升相于2.0mg山梨酸 11.12 苯甲酸标准溶液：准确称取0.2000g苯甲酸用少量乙醇溶解移入100mL容量瓶并稀释至刻度溶液每毫升相于2.0mg苯甲酸 11.13 显色剂：溴甲酚紫－乙醇(50%)溶液(0.4g/L)用氢氧化钠溶液(4g/L)调至pH＝8 12 仪器 12.1 吹风机 12.2 层析缸 12.3 玻璃板：10cm×18cm 12.4 微量注射器：10μL100μL 12.5 喷雾器 13 操作 13.1 品提取称取2.50g事先混合均匀品置于25mL带塞量筒加0.5mL盐酸(1＋1)酸化用1510mL乙醚提取两每振摇1min层醚提取液吸入另25mL带塞量筒合并乙醚提取液用3mL氯化钠酸性溶液(40g/L)洗涤两静止15min用滴管乙醚层通水硫酸钠滤入25mL容量瓶加乙醚至刻度混匀吸取10.0mL乙醚提取液两置于10mL带塞离管约40℃水浴挥干加入0.10mL乙醇溶解残渣备用 13.2 测定 13.2.1 聚酰胺粉板制备：称取1.6g聚酰胺粉加0.4g溶性淀粉加约7mL水研磨3～5min立即倒入涂布器内制10cm×18cm、厚度0.3mm薄层板两块室温干燥于80℃干燥1h取置于干燥器保存 13.2.2 点：薄层板端2cm基线用微量注射器点1μL、2μL品液同各点1μL、2μL山梨酸、苯甲酸标准溶液 13.2.3 展与显色：点薄层板放入预先盛展剂(11.10.1或11.10.2)展槽内展槽周围贴滤纸待溶剂前沿展至10cm取挥干喷显色剂斑点黄色背景蓝色品所含山梨酸、苯甲酸量与标准斑点比较定量(山梨酸、苯甲酸比移值依0.820.73) 13.3 计算 式：X3——品苯甲酸或山梨酸含量g/kg； m5——测定用品液苯甲酸或山梨酸质量mg； V5——加入乙醇体积mL； V6——测定点体积mL； m6——品质量g； 10——测定吸取乙醚提取液体积mL； 25——品乙醚提取液总体积mL注：本同测定酱、汁糖精第四篇 禁用防腐剂定性试验(第四) 14 硼酸、硼砂 14.1 试剂 14.1.1 盐酸(1＋1)：量取盐酸100mL加水稀释至200mL 14.1.2 碳酸钠溶液(40g/L) 14.1.3 氢氧化钠溶液(4g/L)：称取2g氢氧化钠溶于水并稀释至500mL 14.1.4 姜黄试纸：称取20g姜黄粉末用冷水浸渍4每各100mL除水溶性物质残渣100℃干燥加100mL乙醇浸渍数滤取1cm×8cm滤纸条浸入溶液取于空气干燥贮于玻璃瓶 14.2 析步骤 14.2.1 品处理称取3～5g固体品加碳酸钠溶液(40g/L)充湿润于火烘干、炭化再置高温炉灰化量取10～20mL液体品加碳酸钠溶液(40g/L)至呈碱性置水浴蒸干、炭化再置高温炉灰化 14.2.2 定性试验 14.2.2.1 姜黄试纸：取部灰滴加少量水与盐酸(1＋1)至微酸性边滴边搅拌使残渣溶解微温滤姜黄试纸浸入滤液取试纸置表面皿于60～70℃干燥硼酸、硼砂存试纸显红色或橙红色其变色部熏氨即转绿黑色 14.2.2.2 焰色反应取灰置于坩埚加硫酸数滴及乙醇数滴直接点火硼酸或硼砂存火焰呈绿色 15 水杨酸 15.1 试剂 15.1.1 三氯化铁溶液(10g/L) 15.1.2 亚硝酸钾溶液(100g/L) 15.1.3 乙酸(50%) 15.1.4 硫酸铜溶液(100g/L)称取10g硫酸铜(CuSO4?H2O)加水溶解至100mL 15.2 析步骤 15.2.1 品提取按GB/T 5009.289.1操作乙醚提取液蒸干残渣备用 15.2.2 定性试验 15.2.2.1 三氯化铁：残渣加1～2滴三氯化铁溶液(10g/L)水杨酸存显紫堇色 15.2.2.2 确证试验：溶解残渣于少量热水冷加4～5滴亚硝酸钾溶液(100g/L)4～5滴乙酸(50%)及1滴硫酸铜溶液(100g/L)混匀煮沸0.5h放置片刻水杨酸存呈血红色(苯甲酸显色)附加说明：本标准由卫部卫监督司提本标准第由卫部食品卫监督检验所负责起草；第二由津食品卫监督检验所、辽宁省食品卫监督检验所、武汉市卫防疫站、浙江省卫防疫站、四川省卫防疫站负责起草；第三、四由卫部食品卫监督检验所负责起草本标准由卫部委托技术归口单位卫部食品卫监督检验所负责解释

1.粉碎样品，取样2-3g于25mL容量瓶中。2.加适量水（约15mL）溶解，剧烈震动或者超声提取5分钟左右。3.加入乙酸锌和亚铁氰化钾溶液各2mL，震荡均匀，用水定容，过一次性针孔过滤器，即可上机测试。

不带进去其他离子