A、非同源染色体上的非等位基因之间遵循自由组合定律,A错误;B、杂合子与纯合子基因组成不同,但性状表现可能会相同,如AA和Aa,B错误;C、孟德尔巧妙设计的测交方法能用于检测F1的基因型和F1产生配子的种类及比例,C错误;D、F2的3:1性状分离比实现的条件之一是雌雄配子的随机结合,D正确.故选:D.