一般我们不知道5‘端到底有多长，用SMART技术只能说得到了5‘端UTR，说明得到完整CDS，但不能确定得到全部5‘端UTR，也就不能确定是否是转录起始点。用RLM（RNA ligase-mediated）RACE的方法可以确保得到全部5‘端UTR，这才能确定起始位点。genetics183(站内联系TA)Originally posted by won7 at 2010-07-23 16:06:02:
本来smrter就很贵了，不想再买其 ... 按照试剂盒的要求设计引物，通常成功率还是很高的
我记得好像是GC含量60%，Tm值70shaquila(站内联系TA)我觉得即使是RLM也不能确保，只能说非常靠近，我发现有时候做5RACE时候存在多个长度稍微不同的转录本，不算接头其第一个碱基都是G，十分古怪，说明都有帽子结构qwertY23(站内联系TA)你们说的都有道理。race技术现在在市场上，还是比较难做的 。尤其是5”段。我们实验室的race项目部欢迎各位咨询交流。试剂盒也是有的。
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