绘制吸收曲线:确定测定铁时的最适宜波长
绘制标准曲线:用有限的标准样品的响应来推算一定范围内的响应值对应的浓度;减小单个样品可能出现的误差
加入盐酸羟胺:将样品中所有的Fe(3+)还原为Fe(2+)
加入HAc-NaAc缓冲溶液:使pH在2~9之间,这样邻二氮菲才能与Fe(2+)生成稳定的橘红色配合物
酸度对邻二氮菲的显色的影响:若pH过低或者过高,会减小摩尔吸光系数
计算邻二氮菲铁络合物的摩尔吸光系数:测定几个标准样品的吸光度,作出标准曲线(设其相关系数 r 符合要求),得斜率k,则摩尔吸光系数ε=k/b
⑴绘制吸收曲线和标准曲线的目的是什么?
①吸收曲线:横坐标为波长,纵坐标为吸光度的曲线。曲线的形状是物质的定性特征;确定该物质的测定吸收波长(一般为最大吸收波长)。
②标准曲线:横坐标为浓度,纵坐标为吸光度的曲线。标准溶液浓度由低到高序列测定,采用一元线性回归处理得到通过坐标原点的一条直线。在同样条件下,测得未知浓度样品吸光度后,由标准曲线可查得对应浓度。所以,标准曲线也叫工作曲线。
⑵为什么在显色前要加入盐酸羟胺和HAc-NaAc缓冲溶液?
①加入盐酸羟胺:铁的自然稳定价态是三价,本法中要求铁为二价,故要用盐酸羟胺将三价铁定量还原为二价铁。
②HAc-NaAc缓冲溶液:本法显色要求控制pH在一定范围,而HAc-NaAc缓冲溶液pH在此范围之内。
⑶酸度对邻二氮菲的显色有何影响?研究表明,适宜范围pH3-8,酸度高了,邻二氮菲有酸效应,酸度低了铁有水解(碱)效应,都会影响有色物质的稳定性,最终影响测定的准确度。
⑷怎么计算邻二氮菲铁络合物的摩尔吸光系数?
取标准系列中浓度与吸光度最大值的计算(其他也可,只是误差可能会大些):
A=KBC,这里A、C、B(比色皿厚度,一般为1cm)已知,并将浓度c浓度换成mol/L,
算出K,这使得K称为摩尔吸光系数,单位 L/(mol·cm)